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小鼠腦微血管內皮細胞的7個實驗步驟

更新時間:2020-07-20點擊次數:2056
  小鼠腦微血管內皮細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。
  細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養基后再吹打分散進行傳代。
  實驗步驟:
  ① 入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;
  ② 倒置顯微鏡下觀察細胞形態,確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液37℃下預熱;
  ③ 超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;
  ④ 打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;
  ⑤ 點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管,安上橡皮頭,過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內;
  ⑥ 將培養用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;
  ⑦ 倒掉培養細胞的舊培養基,洗去殘留的就培養基,或用少量胰酶涮洗一下。
  小鼠腦微血管內皮細胞培養步驟:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養基后吹勻。
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